Spark^®

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A lot of research is devoted to the search for new compounds with bioactivity against bacteria. However, it is important to distinguish between antimicrobial activity and antibiofilm activity. Antimicrobial activity affects bacterial growth, and reduced growth can simultaneously result in a decrease in biofilm production. Antibiofilm activity only affects the formation of biofilms. Therefore, the use of antimicrobial compounds at concentrations that are not bactericidal against all susceptible bacteria often leads to the emergence of resistant strains. In contrast, antibiofilm compounds do not affect bacterial growth, and so do not generate the same opportunities for resistance to develop. This Application Note describes the SIMBA – SIMultaneous detection of antiMicrobial and anti-Biofilm Activity – method using the Spark multimode reader to generate OD600 growth curves for S. Infantis in a 96-well microplate over a 20- hour period, allowing the parallel determination of antimicrobial and antibiofilm activities of selected cold water fungal extracts.

Environmental pathogens are microorganisms that inhabit our surroundings, living outside of a human host for a large portion of their lifecycle. Many of these micro-organisms cause severe pathogenic conditions in plants and are often the reason behind significant crop failures that in turn lead to economic damage. Environmental pathogens can also cause diseases in humans and, in some cases, lead to severe infections that are difficult to treat. There is therefore a need for accurate methods to study these pathogens, and a common way to do that is through turbidimetric measurements. The aim of the current study was to investigate how bacterial growth is affected by temperature, using two different environmental pathogens – the rod-shaped Gram-negative Pseudomonas syringae and Erwinia amylovora.

生物発光共鳴エネルギー転移（BRET）は、生細胞における蛋白質‐蛋白質相互作用の研究のための十分に確立された検出技術です。最新世代のBRETアッセイであるNanoBRET™は、非常に明るいNanoLuc®ルシフェラーゼと長波長アクセプターフルオロフォアを採用しており、検出感度が著しく向上し、ダイナミックレンジが高くなります。本アプリケーションノートでは、NanoBRET標的結合細胞内HDACアッセイを用いて、Sparkマルチモードリーダー上でのNanoBRETテクノロジーの実施について説明します。

新しいValitaTITERアッセイは、IgGおよびFc含有タンパク質細胞培養上清中でIgGおよびFc含有タンパク質を直接検出および定量するための非常に正確で費用効果の高いソリューションを提供します。このアプリケーションノートでは、SparkおよびInfinite 200 PROマルチモードプレートリーダーでValitaTITERアッセイキットを使用してIgG/Fcタンパク質定量を実施するための最適なプロトコルを示します。（本文は英語です）

温度は生化学反応の率と力学に影響する主な要因です。Spark®マルチモードリーダーの独創的なTe-Cool™モジュールにより、環境温度を下回っても測定が可能です。これによって、アッセイの力学への検査室内温度上昇の影響を制限します。温度依存性のアッセイを安定化し、より再現性と信頼性の高い結果を実現するのに役立ちます。 （本文は英語です）

蛍光下部測定用Optimal Read機能は、6～384ウェルプレート用の励起およびウェル全体での発光中の均一なウェル内照明を可能にするために設計されています。各ウェルを横断して配列された空間的に分離されたスポット上で複数の測定を行うことで、不均一な細胞層でも、効果的に再現性を持って分析できます。このアプリケーションノートは、Optimal Read機能は粘着性の細胞タイプの分析で最も信頼性の高い結果を生み、セルベースのアプリケーション用にウェル間の高い均一性と最高の感度を提供することを示します。 （本文は英語です）

細胞数測定、細胞生存率解析、および粒度分布の判定は、さまざまな分野の研究者たちが、ダウンストリーム実験での標準的な細胞継代培養からバキュロウイルスに感染した昆虫細胞による組み換えタンパクの生成や幹細胞の分化能判定まで、さまざまな作業において日常的に行っています。TecanのSparkマルチモードリーダーは、統合された明視野細胞イメージングモジュールを備えています。この特許出願中のシステムを、使いやすい使い捨てのCell Chip™と併用することで、ラベルフリー細胞数測定、粒度分布測定、トリパンブルーベースの細胞生存率解析が可能になります。この研究では、組み換えSf21培養細胞での最適なタンパク質生産速度を決定するため、細胞濃度、細胞生存率、および粒度分布の分析が行われました。（本文は英語です）

HTRF is a time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET)-based assay system from Perkin Elmer cisbio, and is popular for the analysis of various molecular interactions and binding studies. HTRF assays place high sensitivity demands on multimode readers. The Spark offers a number of features to meet these demands and to ensure optimal assay performance, including Tecan’s unique Fusion Optics which combine the sensitivity of filters and the flexibility of monochromators (MCRs) in one instrument. In addition to entirely filter- or MCR-based measurements, a combination of the two can be used simultaneously within one measurement. Automated Z-position optimization and an integrated dichroic mirror that is perfectly suited to HTRF measurements further increase the Spark’s outstanding sensitivity. This application note describes the validation of the Spark reader, equipped with standard fluorescence optics, for HTRF measurements.

このアプリケーションノートは、SparkマルチモードリーダーへのAlphaScreenの導入成功および感度、均一性および典型的な読み取り時間の測定に関する機器の性能について説明します。 （本文は英語です）

このアプリケーションノートは、SparkマルチモードリーダーへのAlphaScreenテクノロジーの導入成功およびAlphaScreen P-Tyr-100アッセイキットを使用したチロシンキナーゼのアクティビティの検出について説明します。 （本文は英語です）

このアプリケーションノートは、SparkマルチモードリーダーへのAlphaLISAテクノロジーの導入およびAlphaLISA IgGアッセイキットを使用したヒト免疫グロブリンG（IgG）の検出について説明します。 （本文は英語です）

細胞イメージングが統合されたTecanのSparkマルチモードマイクロプレートリーダーは、品質チェックと細胞コンフルエンス用の信号正規化の機能を備えているため、セルベース研究の自動化を促進します。（本文は英語です）

マルチモードリーダー用の初めての空調システムによって重要な実験条件の制御を維持し、18°Cまでの安定した測定チェンバー温度を実現します。（本文は英語です）

化合物介在性細胞毒性イベント後の適切な時間内での細胞アッセイは、極めて難しいものになります。このアプリケーションノートは、Sparkマルチモードリーダーでの細胞生存率、細胞毒性およびアポトーシス評価用の3つのPromega社のアッセイを使用した、細胞毒性および細胞生存率の運動モニタリングの自動化について説明します。（本文は英語です）

細胞移動は多細胞生物の開発および維持の中心となるプロセスであり、胚発生中の組織形成、創傷治癒、および免疫反応にはすべて、細胞の組織的な動作と集合が必要になります。（本文は英語です）

TecanのSparkマルチモードマイクロプレートリーダーは、信頼性と利便性に優れた方法で細胞生存率、増殖およびアポトーシス評価を行うために確立されたアッセイを使用して、ヒト幹細胞増殖および分化のリアルタイム分析用に使用されました。（本文は英語です）

TecanのSparkマルチモードマイクロプレートリーダーは、PromoCellによって開発されたいくつかの確立済みの信頼性の高いセルベースアッセイを使用して、ヒト間葉幹細胞の分化中に代謝の変化を特定し、細胞生存率、細胞毒性およびアポトーシスの評価と定量を行うために使用されました。（本文は英語です）

高発現クローンの同定および分離、候補のノックダウン、小規模な抗体やタンパク質の生産など多くのセルバイオロジー用途において、細胞株は単一の細胞由来であること、すなわちモノクローナルであることが重要です。これは特に学術研究所において、大きなボトルネックとなる場合があります。専用の自動顕微鏡システムは非常に高価でかつ操作が難しいため、単クローン性の検証はしばしばマニュアルの顕微鏡検査によって行われているからです。（本文は英語です）

Plate based titer quantification with PAIA titer assay and Tecan Spark® multimode reader.

Homogeneous Time-Resolved Fluorescence (HTRF), a time-resolved fluorescence resonance energy transfer (TR-FRET) assay system developed by Cisbio Bioassays, part of Revvity’s portfolio, is a highly reliable assay technology for studying molecular interactions. This application note summarizes the performance of the Spark reader with enhanced fluorescence optics for HTRF assays. All available optics configurations of the Spark’s Fusion Optics system meet the requirements for HTRF certification and are HTRF-compatible. Unless otherwise stated, the data presented was acquired using filter-based optics, as recommended for high performance HTRF measurements.

Fast and reliable nucleic acid quantification and purity checks are important daily routine applications for many laboratories, driven by the widespread use of next generation sequencing and other high throughput nucleic acid analysis techniques. Many methods require rapid, accurate analysis of small sample volumes to keep pace with downstream processes.This technical note shows the optimized Spark measurement settings, as well as comparative results, for the commonly used fluorescence-based DNA quantification assays evaluated in this study.

This technical note describes a method to perform UV[1]based protein quantification using the Spark multimode reader and the low volume NanoQuant Plate with the one-click SparkControl application. It shows comparative data for UV absorbance-based protein quantification in microplates and the gold standard for dye-based methods, the Pierce™ BCA assay. The study results can be used as a guideline to help scientists choose the right method for their specific application.

Evaporation has a huge impact on the performance of both biochemical and cell-based assays, changing reagent, component and metabolite concentrations to alter reaction kinetics and cell physiology. It is therefore crucial to keep the consistency throughout the whole plate to allow comparison of data between wells during life sciences experiments. This technical note highlights the benefits of using the Tecan’s Humidity Cassette in combination with the Spark. The Humidity Cassette can minimize the impact of edge effects in microplates under certain conditions. It provides better uniformity and delivers more reliable data for long-term studies.

Spark’s fluorescence module is available with a choice of filters, monochromators or Fusion Optics – a novel combination of both monochromators and filters. The Fusion Optics module combines the flexibility of monochromators with the sensitivity of filters in a single device, and even within individual measurements. In addition to this enormous flexibility, users can choose either a standard or an enhanced fluorescence module for their Spark multimode reader. The standard fluorescence module is tailored to basic applications, with an exceptionally good performance in the green wavelength range. The enhanced optics module is designed for higher throughput applications in 384- and 1,536-well plates, and offers better performance in the red and blue wavelength range, as well as for high throughput screening (HTS) assays, including TR-FRET and FP.This technical note describes the differences in the sensitivity-to-speed ratio of the standard and enhanced modules in 96- and 384-well plates for measurements using fluorescein (green) and Alexa Fluor® 555 (red).

Monitoring growth of prokaryotic cells and yeast is an important tool in life sciences, as well as in the food industry. This technical note demonstrates the Spark reader’s suitability for the generation of growth curves in the commonly used 24- and 96-well plate formats for three different, well-established bacterial strains, Escherichia coli, Listeria innocua and Staphylococcus capitis. It describes the established methods to generate OD 600 growth curves of all three bacterial strains in 24- and 96-well plates over a period of 8 hours. The influence of important instrument settings, such as shaking, are considered and discussed.

This technical note outlines the use of the Spark reader in combination with the ValitaTITER assay for the quantification of IgG. It offers a comparison of the use of the instrument’s standard and enhanced fluorescence optics, and discusses the optimization of flash number to produce high quality, reproducible data while minimizing read times.

This technical note outlines the use of the Spark reader in combination with the ValitaTITER assay for the quantification of IgG. It offers a comparison of the use of the instrument’s standard and enhanced fluorescence optics, and discusses the optimization of flash number to produce high quality, reproducible data while minimizing read times.

Spark-Stackは、コンパクトで汎用性が高く、フィールドでアップグレード可能なSpark®マルチモードリーダー用のマイクロプレートスタッカーです。6～1536ウェルマイクロプレートの装填、取り外しおよび再スタッキングを含む、典型的なワークフローステップの自動化に役立てることで、無人運転のための自動化を提供し、検査室の生産性を向上します。Spark-Stackは、Alpha technologyベースのアッセイとフルオロフォアのトランスフェクションがあった細胞などの光感受性アッセイをプレートマガジンの内側で保護するためにダークカバーを備えています。（本文は英語です）

ワンクリックLive Viewerソフトウェアアプリケーションは、Sparkマイクロプレートリーダーを顕微鏡に変えます。マイクロプレート内またはTecanの特許取得済みCell Chip™内の細胞の簡単で単純な視覚的品質チェックを可能にし、測定の開始直前に細胞サンプルの画像を自動に入手し、即時に表示できるようにします。（本文は英語です）

Sparkリーダーは、単一のマルチモードリーダー内のフィルターとMCRのメリットを組み合わせたTecan独自のFusion Opticsを備えています。Sparkは、フィルター、Quad4モノクロメーターまたは独創的なSpark Fusion Opticの使用して両方を組み合わせて装備することができます。（本文は英語です）

新しいSparkマルチモードマイクロプレートリーダーは、正確性が高く、再現性のある超高速吸光測定を可能にする特許出願中のHigh Speed Monochromators（HSM）を装備しています。この独自の光学システムは、200～1,000 nmの強化された測定範囲を提供し、A260/A230核酸純度確認などの特に深いUV域での吸光測定のため全範囲で最適な性能を確保します。Sparkリーダーは、特許取得済みのNanoQuant Plateを使用して、吸光測定および蛍光モードで低容量サンプルの測定にも適してします。（本文は英語です）

Sparkの発光モジュールにより、ユーザーは高感度フラッシュおよびグロー発光測定を実施できます。1件の実験内での極めて大きいまたは小さいシグナルの最適化されたシグナル検出用の光学密度（OD）フィルターは、OD1～OD3の範囲内での強力なシグナルの減衰に役立つため、「過剰な」読み取りを回避します。これにより、ユーザーは9桁以上のダイナミックレンジで発光シグナルを検出できます。5つまでの異なるLuciferaseと共に、マルチカラー発光アッセイと発光スペクトラムスキャニング（発光タンパク質など）は、革新的なフィルター方式のアプローチを使用して簡単に設定できます。ユーザーは、15 nmおよび25 nm帯域のステップサイズで398 nm～653 nmの波長を選択できます。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、フラッシュおよびグロー発光に関して、Sparkマルチモードリーダーの最適化された試験設定、機器設定および最大機器感度の決定に使用された統計式について説明します。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、最適化された試験設定、機器設定および上方蛍光強度読み取りモード（FI上方）での標準フルオロフォアラベルの最高検出限界の決定に使用された統計式について説明します。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、最適化された試験設定、機器設定および均一時間分解蛍光強度読み取りにおけるユーロピウムの最高検出限界の決定に使用された統計式について説明します。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、最適化された試験設定、機器設定およびFI下方モードにおける最高検出限界の決定に使用された統計式について説明します。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、Sparkリーダーの優れた性能を、他社による2種類のマルチモードリーダーと比較して紹介します。Cy5に匹敵する蛍光スペクトルスキャンを持つ近赤外蛍光染料Alexa Fluor 647での検出限界を、各装置をMCRモードで動作させて判定しました。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、Tecanの次世代ハイエンドマルチモードリーダープラットフォームSpark上でのDLRアッセイシステムの導入について説明します。9桁以上のダイナミックレンジでの高感度フラッシュおよびグロー発光測定を実行できます。また、強化された発光モジュールは5つまでの異なるLuciferaseでマルチカラーアッセイを測定でき、発光物質のスペクトラムスキャンを提供します。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、Sparkマルチモードマイクロプレートリーダーおよび細胞イメージングモジュールに加え、SparkControlソフトウェアとその専用Cell Counting and Cell Viabilityアプリケーションの機能と利点について説明します。（本文は英語です）

このテクニカルノートは、Sparkセルカウンティングモジュールの性能を（i）C-Chip™使い捨て血球計および標準顕微鏡を使用するマニュアルでの細胞数測定、（ii）価格が競合するイメージベースの細胞数測定装置（装置A）および（iii）細胞数測定機能付きの高性能細胞イメージャー（装置B）と比較します。（本文は英語です）

Transcreener® ADP2 TR-FRET Red Assayは、近赤外時間分解- 蛍光共鳴エネルギー転移測定（TR-FRET）読み出しによるADPと競合するイムノアッセイです。キナーゼまたはATPアーゼによるアデノシン二リン酸（ADP）生成の検出を目的とし、ハイスループットスクリーニングアプリケーションのために特に開発されました。Fusion Opticsの4つの異なる組み合わせを使用して、SparkがTranscreener ADP2 TR-FRET Red Assayを測定する能力の試験が行われました。（本文は英語です）

Transcreener ADP2 FP assayは、ADPの検出に基づく競合するFPアッセイで、タンパク質、脂質および炭水化物キナーゼ、ATPアーゼ、DNAヘリカーゼ、カルボキシラーゼおよびグルタミン合成酵素を含むADPを生成するあらゆる酵素クラスに対応します。このテクニカルノートは、TecanのSparkマルチモードマイクロプレートリーダー上でのTranscreener ADP2 FP assay用の機器設定について説明します。（本文は英語です）

Transcreener ADP2 FIは、シンプルな蛍光強度読み出しを使用しています。ADPに対して極めて感受性の高い抗体によるADPの検出に基づく同種の競合アッセイです。Transcreener ADP2 FI assayは、タンパク質、脂質および炭水化物キナーゼ、ATPアーゼ、DNAヘリカーゼ、カルボキシラーゼおよびグルタミン合成酵素を含むADPを生成するあらゆる酵素クラスに対応します。このテクニカルノートは、Transcreener ADP2 FI assay用TecanのSparkマルチモードリーダーの機器設定について説明します。（本文は英語です）

The Host-Microbiota Interactions Lab at the Wellcome Sanger Institute uses high throughput anaerobic microbiology, genomic and metagenomic approaches to explore the relationship between humans and their microbiome – the community of microorganisms that live on and in us. HMIL has developed techniques to culture strict anaerobic gut bacteria at scale and built an extensive culture collection for phenotypic profiling. To phenotypically screen this culture collection, HMIL uses a Spark multimode reader equipped with an integrated stacker module – the Spark-Stack™ – for automated and high throughput plate processing, which is housed in a Whitley A135 HEPA Anaerobic Workstation. This allows the generation of bacterial growth curves cultured in multiple microplates under stringent anaerobic conditions, i.e. at 0 % O2 using a dedicated and pre-optimized gas mix (80 % N2 , 10 % CO2 and 10 % H2 ). Here, we describe accurate profiling of the growth kinetics of strict anaerobic gut bacteria.

細胞イメージングが統合されたTecanのSparkマルチモードマイクロプレートリーダーは、品質チェックと細胞コンフルエンス用のシグナル正規化機能を備えているため、セルベース研究の自動化を促進します。（本文は英語です）

マルチモードリーダー用の初めての温度管理システムによって重要な実験条件の制御を維持し、18°Cまでの安定した測定チェンバー温度を実現します。（本文は英語です）

in vivoシステムに匹敵する結果を提供するin vitroシステムを代表するため、ライフサイエンス分野における研究でのセルベースアッセイの人気は高いです。しかし、この改善された生物学的関連性は、有機体で作用する複雑性によって相殺されています。そのため、セルベースアッセイには、実験の計画および実施時に特別な予防措置と注意が必要です。（本文は英語です）

Spark®マルチモードマイクロプレートリーダーは、あらゆる創薬研究やライフサイエンス研究に適したテーラーメードのソリューションです。研究者が現在のニーズに合わせてプレートリーダーを自由に設定することができます。また、将来的には新しい技術や機能に合わせてアップグレードすることができます。

Spark専用のコンパクトなプレートスタッカーです。1回のランで最高50枚までのマイクロプレートのバッチ処理を自動化できます。