Spark® Cyto

生細胞イメージングとリアルタイムでのサイトメトリを実現するプレートリーダー

Spark Cytoは、蛍光イメージングとサイトメトリー機能を備えたマルチモードプレートリーダーです。セルベースアッセイに新たな可能性を見出します。 生細胞イメージングと業界最先端の検出技術を組み合わせることで、同じ条件下でリアルタイムに様々なデータを解析できるので、研究の効率化とデータの信頼性が得られます

細胞の状態は常に変化していますので、生細胞の決定的瞬間を見逃さない機器が求められます。細胞の状態や蛍光イメージングなどのデータを解析しながら実験することで,ベストタイミングでアッセイを行うことが可能です。また,プレートリーダーとして分子間相互作用の状態なども同時に解析することにより、全細胞情報を包括的に取得できます。

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重要な生物学的イベントを見逃さないように、細胞実験に革命をもたらします。

LSIA2019 logo Silver

Silver winner of the Bioinformatics Life Science Industry Award 2019 in the category:
Innovation – Best New Product Cell Biology.

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The Spark Cyto can be an excellent support in any cell biology laboratory.

Fabio Gasparri, Nerviano Medical Sciences on SelectScience




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Tab 01 / 概要
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Spark Cytoにより全細胞情報を包括的に取得します。

より多くの細胞を分析

Spark Cytoは、最先端のカメラコンポーネントと独自の特許出願中のテクノロジーを組合わせて、細胞集団全体を評価できるようにします。 一枚の視野で96または384-ウェルマイクロプレートの全ウェル領域を撮影することが可能です。 これは、マイクロプレートウェル内の全細胞数を調べるときに、細胞を見逃すことがないことを意味します。 Spark Cytoには、 4チャンネルの蛍光および明視野イメージングと3種類の倍率のレンズが含まれているため、さまざまなアプリケーションで高品質のセルベースアッセイが可能です。

イメージングモジュールの詳細はこちら

SLAS Europe 2019でSpark Cytoを開始 - Lynda O'Leary

包括的なデータの取得

Spark Cytoは、4種類のコンフィグレーションがあります。プレートリーダーとしての測定モードは現行のSparkと同じです。 イメージング機能とマルチモードリーダー機能を組み合わせることで、研究への新しいアプローチを確かなものにします。イメージングとプレートリーダーの両方のデータを迅速に取得できます。

Learn more about the detection features of the Spark Cyto

More throughput for your experiments

Spark Cyto can be extended with an automated multi-plate cell incubator or integrated in Tecan’s fully automated workflow solutions.

Learn more how to scale up your research Spark Cytoの検出モードの詳細はこちら

より強力な実験コントロール

様々なサイメトリアプリケーションに対応するSpark Cytoは、使いやすさや便利さを犠牲にすることなく、新たなレベルの実験コントロールを実現します。サイトメトリアプリケーション用の5つの定義済みメソッドを使用することで容易にイメージ取得と分析が可能です。さらに「user-defined」パラメーターやReal Time Experimental Control (REC™) などの追加機能により、新たなアプリケーションの構築を実現します。

SparkControl™およびImage Analyzer™についての詳細はこちら

Spark Cytoの性能*

アプリケーション

  • セルカウント
  • トランスフェクション効率
  • 細胞生存率
  • アポトーシス
  • コンフルエンス測定
  • 細胞遊走能と創傷治癒
  • ELISAs
  • 微量DNAおよびRNA定量化
  • 核酸標識効率
  • タンパク質定量化
  • レポーター遺伝子アッセイ
  • HTRF®, DELFIA®, LanthaScreen®
  • Transcreener®
  • DLR®
  • BRET (NanoBRET®を含む)
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測定モード

  • 蛍光イメージング (Blue.Green, Red, Far red)
  • 明視野イメージング
  • デジタル位相イメージング
  • 吸光度 (UV/VISを含む)
  • 蛍光 (上部と下部)
  • 時間分解蛍光 (TRF)
  • 全測定モードでフルスペクトルスキャン機能
  • FRET
  • TR-FRET
  • 蛍光偏光 (FP)
  • 発光 (グロー、フラッシュ、マルチカラー、スキャン)
  • AlphaScreen®, AlphaLISA® and AlphaPlex®
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追加機能

  • 加温・攪拌機能付試薬ディスペンサー
  • Humidity Cassette
  • NanoQuant Plate™
  • IQ/OQサービス用QCツール
  • Spark-Stack™マイクロプレートスタッカー
  • Multi-plate automated cell incubator extension

* Spark Cytoのコンフィグレーションにより対応内容は変化します。




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Tab 02 / テクノロジー
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迅速さとクリアなイメージングを実現する光学系

マイクロプレート内の生細胞サイメトリ用専用光学機器セットアップ

Spark Cyto蛍光イメージングモジュールは、ユーザーによる最小限の介入で、クリアーなイメージを実現するために設計されました。3種類の対物レンズ、5個のLED (明視野および蛍光励起)、マルチバンドフィルターセット、12ビットCMOSカメラを活用し、画素シフトを排除して一瞬で高品質なイメージを提供します。

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イメージャーモジュールの模式図。(1) 明視野用LED、(2) サンプル用マイクロプレート、(3) 対物レンズ、(4) マルチバンドフィルターセット、(5) LEDおよび蛍光用励起フィルター、(6) オートフォーカスユニット、(7) 反射ミラー、(8) CMOSカメラ。

2倍、4倍および10倍の対物レンズ用内蔵対物レンズチェンジャー。

対物レンズとチャンネルの選択が容易

SparkControl™ソフトウェアで随時、容易に選択可能な3個の対物レンズを搭載しています。

  • 2x、NA=0.08
  • 4x、NA=0.13
  • 10x、NA=0.30

特許出願中のLEDベースのオートフォーカスシステム。

  • Blue (381-450 nm)
  • Green (461-530 nm)
  • Red (543-611 nm)
  • Far red (626-800 nm)
  • 明視野およびデジタル位相コントラスト
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画素シフトなしの合成イメージ

光学システムには、5つのチャンネルの組み合わせで、ウェルのイメージを撮影します。これには光学装置を動かさないこと、またはプレート移送が必要です。画素シフトを排除し、特に2つ以上のチャンネルを使用する場合に優れたイメージ品質と取得スピードを実現します。

オートフォーカスを実現―研究に集中できます

Spark Cytoは、特許出願中のLEDベースのオートフォーカスシステムを活用し、スキャン時間を犠牲にすることなく正確なイメージを実現します。オートフォーカスシステムは、大型グリッドパターンをサンプルの表面に投影し、分離された不純物による想定される歪みの影響を最小化して、お客様のサンプルに最適の焦点を探せます。すべての機器で標準機能のシンプル、高速で効果的なオートフォーカスで、イメージを見逃すことはありません。

Live Viewer™

Live Viewerソフトウェアアプリケーションにより、Spark Cytoは、イメージサイトメーターとして使用でき、リアルタイムでの細胞の観察を実現します。すべての光学チャンネルと拡大レベルは、Live Viewerで利用可能です。Live Viewerはソフトウェアのダッシュボード画面から、またはMethod Editorのインターフェースから専用のアプリケーションとして操作が可能であり、測定開始前の蛍光チャンネル間でのフォーカスのオフセットまたはクロストークなどのパラメーターを最適化します。

ウェル全体のクリアーな画像撮影

2倍対物レンズによる記録済み96ウェルプレートのウェルの全体像ビュー。HeLa細胞は、カルセインAMとヨウ化プロピジウムによって染色され、細胞生存率アプリケーションによって分析されました。ウェルの全体イメージは、局所的に毒性が有意に高いウェル内のエリアを明らかにし、化合物の分注に関連する影響を示すことができます。

96および384ウェルプレートのウェル全体のイメージング

Spark Cytoでは、1つの画像で96または384ウェルプレート内の各ウェルの全体イメージを実現し、各ウェルの各細胞のインサイトをお客様へ提供します。特許出願中の広視野テクノロジーであるSpark Cytoで、アーチファクトのスティッチングやエッジ間イメージコントラストに悩まされることなく、高品質のウェル全体のイメージを取得できます。これにより、より短い時間でお客様の細胞集団の全体像を把握し、研究を新たな方向へ進めることができます。

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96ウェルプレートからのウェルの全体像を1つのイメージで。タイリングやエッジ間の光学的歪みがないことで、細胞集団の分析時により良い結果が得られます。

1つのイメージがストーリー全体を語る

数多くのイメージングシステムがウェル全体の高品質なイメージを取得できると宣伝していますが、ほとんどは効率的に実行できる機能がありません。これらのシステムは、タイリングまたはスティッチングを利用して合成イメージを作成し、ウェル境界の流体メニスカスの影により、細胞集団を不正確に表示し、歪みによる影響を受けます。

Spark Cytoは、1つのイメージでウェル全体 (96および384ウェルプレート) を捉えます。

Spark Cytoは、2倍 (96ウェルプレート) または 4倍 (384ウェルプレート) 対物レンズで得たイメージと大型化カメラチップと先進イメージングアルゴリズムを組み合わせた特許出願中のアプローチを利用し、1つのイメージで正確な結果を提供します。

  • 96ウェルプレートでは12分以下
  • 384ウェルプレートでは45分以下
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4倍対物レンズを使用して記録した24ウェルのウェル全体のイメージングパターン。

その他のプレートフォーマットでのウェル全体のイメージング

初代細胞株は、6~48ウェルプレートでより良い増殖動態を示す傾向があります。複数の単一イメージのタイリングから構成される合成イメージにより、Spark Cytoは、このようなアプリケーションにウェル全体のイメージングを実現します。

Spark Cytoは、Tecanの細胞培養プレート用に最適化されており、この組み合わせによりセルベースアッセイの最高のイメージング品質を保証します。

Tecanの96ウェル透明細胞培養プレート。Spark Cytoの光学機器は、これらのプレート用に開発および検査され、96ウェル分析用のウェル全体の最高のイメージ品質を保証します。

最適な結果のために最適化されたプレート

Tecanは、24、48、96および384ウェルフォーマットで特許取得済み透明細胞培養プレートを提供しています。Spark Cytoの機能は、Tecanの細胞培養プレートと共に使用することに最適化されており、光学的アーチファクトの低減と最適な結果を確保します。




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Tab 03 / アプリケーション
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プレインストール済みの5つのアプリケーション、さらなる可能性

直観的なイメージ取得と分析メソッド

Spark Cytoは、最も一般的なサイメトリアプリケーションへのユーザーフレンドリーなアプローチを採用しています。

  • コンフルエンス
  • セルカウント
  • トランスフェクション効率
  • 細胞生存率
  • 細胞死

その他のすべてのアプリケーションでは、シンプルに「user-defined」オプションを選択して、SparkControl™上のメソッドで簡単にセットアップするか、「image-only」機能を使用してお客様のファイルをサードパーティーのイメージソフトウェアへエクスポートします。これにより、お客様の個々のアッセイ要件を満たす完全な柔軟性を提供します。

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Dr. Jens Peter von Kries - Head of Screening Unit.Leibnitz Forschungsinstitut FMP & MDC

2倍対物レンズを使用した96ウェルプレートからのウェル全体のイメージ。コンフルエンス評価マスクを伴ったNNHDF細胞。

コンフルエンス

明視野イメージングチャンネルを使用して、ウェルの細胞密度の全体像を素早く提供します。細胞コンフルエンスは、ソフトウェアによって自動計算され、簡単に視認できるようイエローのオーバーレイとして表示されます。さらに、細胞死の簡単な指標として、定性的測定のラフネスファクターをカスタマイズできます。

4倍対物レンズを使用した384ウェルプレートからのウェル全体のイメージ。核数測定オブジェクトマスクを伴ったCHO細胞。

セルカウント

DNA結合能をHoechst 33342を使用することで、Spark Cytoで簡単に細胞数測定を提供します。

4倍対物レンズを使用した96ウェルプレートで培養されたCHO細胞の中心イメージ。ブルーおよびグリーンのチャンネルのオーバーレイを示す。

トランスフェクション効率

Hoechst 33342で核染色された細胞に対して緑色蛍光タンパク質 (GFP) 発現細胞の割合を計算することで,トランスフェクション効率を自動判定できます。

明視野のオーバーレイ、グリーンおよびレッドチャンネルを示す10倍対物レンズによる24ウェルプレート内で培養されたHeLa細胞の画像。

細胞生存率

Spark Cytoにプリセットされた細胞生存率アプリケーションは、集団内の生細胞 (グリーン) と死細胞 (レッド) を区別するため、二重染色法を採用しています。カルセインAM (生細胞) およびヨウ化プロピジウム (死細胞) などの2つの蛍光色素使用し、数分以内で細胞集団のイメージングと分析を行います。

10倍対物レンズで取得した96ウェルプレートで培養されたA431細胞のイメージ。ブルー、グリーンおよびレッドのチャンネルのオーバーレイを示す。

細胞死

アポトーシスとネクローシスの検出はHoechst 33342、ヨウ化プロピジウムおよびAnnexin V-FITCなどを使用し、細胞死に関連するタイプに特徴的なマーカーの染色によって行うことができます。

Hoechst 33342 (Blue) - 核染色

ヨウ化プロピジウム (Red) - ネクローシス細胞/後期アポトーシス細胞

Annexin V-FITC / Alexa Fluor® 488 (Green) - 初期アポトーシスマーカー・ホスファチジルセリンと結合

  • Blue - 細胞核
  • Blue/Red - ネクローシス細胞 (生細胞対ネクローシス細胞比)
  • Blue/Red/Green - アポトーシス細胞 (アポトーシス細胞対ネクローシス細胞比)
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Multi-Color analysis

Spark Cyto’s easy to use Multi-Color application is ideal for counting and analyzing cells with multiple labels, using a fluorescence marker for the nucleus and up to two additional labels to automatically characterize your cells.

透過率

さらなる可能性

Spark CytoのMethod Editorは、アッセイのカスタマイズを期待する研究者に2つの独自のオプションを提供します。

  • ユーザー定義プロトコール―自動画像取得と分析用に特化したイメージプロトコールのセットアップ
  • イメージングのみ―Image JまたはCellProfilerなどのサードパーティーイメージ分析ソフトウェアへのファイルの取得とエクスポートを実現。

Real Time Experimental Control (REC™)―細胞の決定的瞬間を見逃しません!

RECにより、お客様のラボで新たな実験ワークフローを作成できます。標準検出テクノロジー、イメージ機能および細胞培養環境の管理などの独自機能を組み合わせることで、RECは新たな研究の可能性の扉を開きます。

RECは、これらすべての機能を活用して、機器の前に釘付けになる必要なく、重要な生物学的イベントを見逃さないワークフローのセットアップを可能にします。

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完全な環境管理が標準装備

Spark Cytoは、マイクロプレート内で管理された測定条件のために独自の環境機能を提供します。

  • 均一温度制御 (~42 °C)
  • ダイナミックガスコントロール(CO2およびO2)
  • Lid Lifter™とHumidity Cassetteによる湿度制御

組み合わせることで、これらの機能はお客様のアッセイで安定した細胞培養環境を維持し、温度変化や蒸発が細胞へ及ぼす影響のリスクを排除します。Spark Cytoは、これらの機能をすぐに使える唯一の機器です。

これらのすべての機能は、SparkControlソフトウェアで簡単にプログラムおよび制御できます。

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適切な蒸発防止のための温度制御

湿度を95%以上に保つことは、細胞生存率と成長を損なわないための重要な要素です。また、蒸発を最小限に抑えることは、長期アッセイ中の濃度維持に不可欠です。Sparkの特許出願中のHumidity Cassetteは、蒸発を最小限に抑える費用対効果の高いソリューションです。

Lid Lifter

Sparkの特許取得済みのリッドリフティング機能は、新しいワークフローの可能性を創り出し、サンプル汚染のリスクを低減して、長期カイネティックアアッセイに最適な環境の確立に役立ちます。マニュアルによる介入なしに試薬の分注を行う場合にも、蒸発防止を損なうことなく最適な環境条件を維持します。

長期試験のために設計されたソフトウェア

Spark Controlは、長期カイネティックアッセイの自動化を、カイネティックコンディショニング、リモートモニタリングの機能と組み合わせて、複雑な実験の自動化ソリューションを提供します。

セルベースのカイネティックアアッセイは、一定のシグナルの閾値に到達すると、次のアクションを行う必要があります。条件付きカイネティックスのないマルチモードリーダーは、煩雑な実験を行うことになり、エラーが発生しがちになるおそれを伴います。SparkControlのカイネティクスコンディショニング機能では、事前定義されたシグナルが到達次第、必要なアクションを自動的に実行するようプログラムでき、考えられる限りのあらゆるアッセイワークフローに対応します。




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Tab 04 / ソフトウェア
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Spark Control™―強力なコントロールを直観的なパッケージに

SparkControl はクラス最高のユーザーインターフェースを搭載したソフトウェアです。現在では、Spark Cyto専用イメージングストライプが含まれます。イメージングストライプは、SparkControlの既存のストライプとの組み合わせが可能で、マルチプレックスアッセイの作成を単純かつ容易にします。合理化された新たなストライプにより、オペレーターは、実験に関連するすべてのパラメーターを完全に管理で、余分な情報による負担や貴重な時間を無駄にすることがありません。

Spark Cytoの強力なリーダー制御ソフトウェアであるSparkControlには、自動化細胞イメージングプロトコールをセットアップおよび最適化するための専用ストライプを含みます。イメージングプログラミングストライプは、簡単に多重化を実現するための従来型の検出方法のその他のプログラミングストライプとも組み合わせが可能です。オペレーターは、必要な対物レンズとイメージングチャンネルの選択、表示フィールドの定義、測定に関連するすべてのパラメーターの制御、または標準細胞イメージングアプリケーション用の定義済みのメソッドから1つ選択するだけです。顕微鏡のようなLive Viewerモードへの素早いリンクにより、イメージ取得設定に直接アクセスできます。

SparkControl™ software offers a live viewer mode that turns the reader into a digital microscope, allowing manual inspection of cells, as well as optimization of focus levels, exposure times and LED intensities.

 

Image Analyzer™―堅牢で使いやすい分析ツール

Spark Cytoで取得したイメージは、Tecanの特許取得済みイメージングソフトウェアパッケージであるImage Analyzerによる自動処理が可能です。Image Analyzerは、一連のカスタマイズオプションを提供することで、お客様のイメージングパラメーターの調整と最適化を簡単にします。

Image Analyzerは、アポトーシス誘導後での細胞数 (Hoechst) 、アポトーシス (Annexin V-FITC / Alexa Fluor® 488) およびネクローシス (ヨウ化プロピジウム) の判定のために3色に染色したA431がん細胞を示しています。分析設定により、オブジェクトのセグメンテーションとその後の数測定のためのパラメーター設定ができます。

Spark Cyto's Image Analyzer offers easy data analysis for object segmentation, gating and object counting.

 




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Tab 05 / コンフィグレーション
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アプリケーションに対応したコンフィグレーション

Spark Cytoは、4つの特別なコンフィグレーションでご利用いただけますが、検出モダリティのみが異なります。これは、Spark Cytoの構成にかかわらず、リアルタイム生細胞イメージングサイトメトリを完全装備したシステムであるということです。

Spark Cytoのすべての構成は、以下のリアルタイムサイトメトリのための機能を含んでおり、イメージングマイクロプレートリーダーの標準を再定義します。

  • Lid Lifter™
  • ガスコントロール (CO2/O2)
  • 加温
  • LEDベースのオートフォーカス
  • 対物レンズ (2倍、4倍および10倍)
  • 5個のLED励起、4色蛍光チャンネル
  • デジタル位相コントラストt
  • SparkControl™ソフトウェア
  • Image Analyzer™ソフトウェア
  • 機器コントロールユニット

4つのコンフィグレーションすべてはオプションで追加機能との組み合わせが可能です―概要をご覧ください。




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Tab 06 / 付属デバイス
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Automation for higher throughput

Tecan’s Spark Motion concept enables walkaway automation for live cell experiments on up to 40 plates.

  • Automated cell incubation and analysis of up to 40 plates
  • Multiplexed kinetic growth analysis (eg. luminescence and imaging) increases reproducibility
  • Patented lid-lifting technology in Spark Cyto protects plates outside the incubator, saving costs for expensive safety cabinets
  • Expandable with additional instruments
Interested in complete workflow automation?

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Spark-Stack™ マイクロプレートスタッカー

Spark-Stackは、Spark専用のコンパクトなプレートスタッカーです。1回のランで最高50枚までのマイクロプレートのバッチ処理を自動化できます。

加温・攪拌機能搭載 インジェクター

ディスペンス機能により、フラッシュ発光などの高感度アプリケーションに最適です。インジェクター内の沈殿および塩形成を取り除くことによって一貫性のあるデータを生成します。

Humidity Cassette

蒸発防止機能により、生細胞のカイネティックアッセイが向上します。エッジ効果を最小限に抑えてより再現性と信頼性の高いデータが得られます。

特許取得済みのHumidity Cassetteは、標準マイクロプレート内の蒸発を低減し、長期にわたる生細胞カイネティックスを専用のマイクロプレートタイプに切り替える必要なく実現します。現在お使いのバリデーション済みプレートをご使用いただくだけです。メリットには次のようなものがあります:

  • アッセイ中の蒸発の低減
  • 既存のプレートを使用可能-高価な特製プレートの必要なし
  • より良いデータ品質-一貫性のある結果
  • エッジ効果の削減-長期のカイネティックアッセイに最適
  • 安定した条件-より良い細胞生存率
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Tecanマイクロプレート

TC処理および滅菌済み、フタ付き細胞培養プレートは細胞コンフルエント測定や細胞ベースアプリケーション用下方蛍光測定に最適です。最小限のバックグラウンドで測定可能です。

詳細はこちら

QCツールおよびIQ/OQサービス

Tecanの品質管理パッケージは、効率的で費用効果の高い方法でTecan製マイクロプレートリーダーの規制要件準拠をサポートします。。

詳細はこちら




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Tab 07 / カタログ・資料
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アプリケーションガイド

LEARN – SELECT – MEASURE

アプリケーションノート

Spark Cytoマルチモードリーダーによるワークフローの自動化。

温度変化による骨形成分化誘導後のhfob.1.19細胞のレポーター活性の自動化モニタリング

テクニカルノート

spark cytoを使用した蛍光イメージング―sparkcontrol™を使用して一瞬で取得

明視野と蛍光イメージングを活用した、細胞密度の正確で自動化された評価

マイクロプレート内でのタンパク質発現の自動視覚化および定量化

生存細胞、アポトーシスを起こした細胞および死細胞の区別。

生命の定量化:イメージングサイトメーターによる細胞生存率。

ホワイトペーパー

時間およびコスト優位性をラボへ

How to guide

セルベースアッセイは、科学研究において多様な用途があり、がん研究における抗がん剤抵抗性の検査から創薬における新規化合物の同定まで、多数の科学者のワークフローにおいて不可分なものです。

カタログ / 仕様

Spark Cytoは、リアルタイムサイトメトリのための蛍光イメージングモジュールを搭載した高感度マルチモードリーダーです。

Spark Cytoのカタログはこちら
Spark Cyto典型的性能値はこちら

Automation for higher throughput

Tecan’s Spark Motion concept enables walkaway automation for live cell experiments on up to 40 plates.

  • Automated cell incubation and analysis of up to 40 plates
  • Multiplexed kinetic growth analysis (eg. luminescence and imaging) increases reproducibility
  • Patented lid-lifting technology in Spark Cyto protects plates outside the incubator, saving costs for expensive safety cabinets
  • Expandable with additional instruments
Interested in complete workflow automation?

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特集ウェビナー

Never miss a critical biological event with improved whole-well imaging - This webinar will offer you insight into how to improve the robustness of your live-cell assays to address and overcome some specific causes of the reproducibility problem.

Spark Cytoは研究用途向けです。